偏光顯微鏡的照明方法按其照明光束的構(gòu)成,可分為“透射式照明”,和“落射式照明”兩大類。前者適用于透明或半透明的被檢物體,絕大數(shù)生物偏光顯微鏡歸于此類照明法;后者則適用于非透明的被檢物體,光源來(lái)自上方,又稱“反射式或落射式照明”。首要使用與金相偏光顯微鏡或熒光鏡檢法。
1. 透射式照明
透射式照明法分中心照明和斜射照明兩種形式:
(1) 中心照明:這是更常用的透射式照明法,其特點(diǎn)是照明光束的中軸與偏光顯微鏡的光軸同在一條直線上。它又分為“臨界照明”和“柯勒照明”兩種。
A. 臨界照明(Critical illumination):這是普通的照明法。這種照明的特點(diǎn)是光源經(jīng)聚光鏡后成像在被檢物體上,光束狹而強(qiáng),這是它的優(yōu)點(diǎn)。但是光源的燈絲像與被檢物體的平面重合,這樣就構(gòu)成被檢物體的照明呈現(xiàn)出不均勻性,在有燈絲的部分則明亮;無(wú)燈絲的部分則昏暗,不僅影響成像的質(zhì)量,更不合適顯微照相,這是臨界照明的首要缺陷。其補(bǔ)救的方法是在光源的前方放置乳白和吸熱濾色片,使照明變得較為均勻和防止光源的長(zhǎng)時(shí)間的照射而損害被檢物體。
B. 柯勒照明:柯勒是十九世紀(jì)末蔡司廠的工程師,為了留念他在光學(xué)領(lǐng)域的突出貢獻(xiàn),后人把他發(fā)明的二次成像叫做柯勒照明. 柯勒照明克服了臨界照明的缺陷,是研究用偏光顯微鏡中的理想照明法。這中照明法不僅調(diào)查效果佳,并且是成功地進(jìn)行顯微照相所有必要的一種照明法。光源的燈絲經(jīng)聚光鏡及可變視場(chǎng)光闌后,燈絲像**次落在聚光鏡孔徑的平面處,聚光鏡又將該處的后焦點(diǎn)平面處構(gòu)成第2次的燈絲像。這樣在被檢物體的平面處沒(méi)有燈絲像的構(gòu)成,不影響調(diào)查。此外照明變得均勻。調(diào)查時(shí),可改動(dòng)聚光鏡孔徑光闌的巨細(xì),使光源充溢不同物鏡的入射光瞳,而使聚光鏡的數(shù)值孔徑與物鏡的數(shù)值孔徑匹配。一起聚光鏡又將視場(chǎng)光闌成像在被檢物體的平面處,改動(dòng)視場(chǎng)光闌的巨細(xì)可控制照明范圍。此外,這種照明的熱焦點(diǎn)不在被檢物體的平面處,即使長(zhǎng)時(shí)間的照明,也不致?lián)p害被檢物體。2004年蔡司公司又在傳統(tǒng)柯勒式照明基礎(chǔ)上推出了帶有反光碗的全系統(tǒng)復(fù)消色差照明技能,消除照明色差,增強(qiáng)光的還原性,從而進(jìn)步分辨率,一起照明均勻而光效高。
(2) 斜射照明:這種照明光束的中軸與偏光顯微鏡的光軸不在一向線上,而是與光軸構(gòu)成必定的角度斜照在物體上,因而成斜射照明。相襯顯微術(shù)和暗視野顯微術(shù)就是斜射照明。
2. 反射式照明
這種照明的光束來(lái)自物體的上方經(jīng)過(guò)物鏡后射到被檢物體上,這樣物鏡又起著聚光鏡的效果。這種照明法是適用于非通明物體,如金屬,礦藏等。
上述內(nèi)容就是介紹的偏光顯微鏡的兩種照明方法。更多關(guān)于偏光顯微鏡的問(wèn)題歡迎咨詢小編哦!